lipo3000全新的转染试剂
能转染难处理细胞的通用型试剂:
在难转染细胞类型中具有广泛的优良性能
Lipofectamine? 3000试剂充分利用了我们先进的脂质体纳米颗粒技术,实现了超高转染性能和可重复的试验结果。其可在zui广泛的难转染和通用细胞类型(图1)中获得非凡的转染效率,同时提升细胞存活率。
图1. Lipofectamine? 3000试剂胜过了Lipofectamine? 2000和FuGENE? HD试剂。每一种试剂均用于以96孔形式转染EK 293、HeLa、LNCaP、HepG2和A549细胞系,并在转染后48小时分析GFP表达情况。在所有五种细胞系中,Lipofectamine? 3000都表现出了高于Lipofectamine? 2000和FuGENE? HD的GFP转染效率。
图2. Lipofectamine? 3000操作手册在保持易用性的同时,还保持了优异的性能和可靠性,适用于广泛的细胞系类型。 下载Lipofectamine? 3000操作手册 > |
温和低毒
在开发Lipofectamine? 3000时,我们对转染过程的四个步骤进行了优化,同时结合了我们先进的脂质体纳米颗粒技术。其所具有的超高转染效率使得我们可以减少试剂剂量,降低处理细胞时的潜在毒性风险。
图3. 采用剂量的每种试剂,通过绿色荧光蛋白(GFP)表达载体,以96孔形式转染HeLa细胞。在转染后48小时,采用流式细胞仪进行分析,以测定百分比形式的转染效率以及GFP表达强度。相对于Lipofectamine? 2000试剂和Lipofectamine? LTX试剂,Lipofectamine? 3000试剂表现出了更高的转染效率和蛋白表达水平。 |
使用生物相关性的细胞系,可为您的研究课题提供相关性的答案。Lipofectamine? 3000试剂适用于zui广泛的细胞谱系且兼具较高的转染效率,使您可以非常灵活地在研究中应用自己选择的细胞。
表1. 在不同的细胞系中,Lipofectamine? 3000试剂获得了比Lipofectamine? 2000试剂更高的转染效率。
细胞类型 | Lipofectamine? 3000试剂转染效率 | Lipofectamine? 3000相对于 Lipofectamine? 2000试剂蛋白表达水平提高倍数 |
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3T3 | 4 | |
4T1 | 2 | |
A431 | 2 | |
A549 | 3 | |
ACHN | 2 | |
bEnd.3 | 9 | |
BJ | 3 | |
BT-549 | 4 | |
C2C12 | 3 | |
C6 | 5 | |
Caco-2 | 2 | |
Caki-1 | 4 | |
CHO-K1 | 1 | |
CHO-S | 1 | |
COLO 205 | 4 | |
COS-7 | 4 |
转染效率 (%): <30% 30-50% 51-79% >80%
Lipofectamine? 3000试剂与的Lipofectamine? 2000试剂相比,在多种组织来源的癌症细胞中具有更高的转染效率。在所选的癌症细胞系中,使用Lipofectamine? 2000仅有25%被认为易于转染(>50%的转染效率),而使用Lipofectamine? 3000却有60%的细胞系是易于转染的。
图4. 采用Lipofectamine? 2000试剂和Lipofectamine? 3000试剂将表达GFP的质粒转染至17种癌症细胞系中,利用各试剂推荐的实验方案,在24孔板中进行转染,每孔质粒用量为0.5μg。转染48小时后分析GFP表达情况。重复检测3次,数据点显示平均转染效率 + 标准差。 |
Lipofectamine? 3000优异的转染效率配合Epi5? Episomal iPSC Reprogramming Kit保证了体细胞的重编程,无需电转。
图5. 结果来自于明场显微镜,(A) Lipofectamine? 3000和 (B) Neon? 转染系统都表明在生成iPSC细胞群落时重编程成功了。使用碱性磷酸酶进行末端染色。
改善基因组编辑结果
开发Lipofectamine? 3000试剂,旨在突破输送技术的界限,促进生物相关系统内的新技术发展,例如基因组编辑。通过这一新试剂,GeneArt? TALs 和 CRISPR 可以靶向HepG2和U2OS细胞内的AAVS1位点,同时表现出更佳的转染效率、平均荧光强度和基因组切割效果。这些改进之处有助于zui大限度减少繁重的下游工作,更便于进行干细胞处理,增强转基因在细胞基因组中的位点特异性插入。
下载应用说明 >
图6. GeneArt? TALs 和 CRISPRs的切割效率。TAL和CRISPR靶向(A) U2OS和(B) HepG2细胞系中的AAVS1位点。采用GeneArt?基因组切割检测试剂盒分析切割效率。
图7. 使用CRISPR载体时的转染效率和蛋白表达。该载体含有OFP报告基因,并采用Lipofectamine? 2000或Lipofectamine? 3000转染试剂转染到(A) U2OS和(B) HepG2细胞系中。柱状图所示为报告基因的表达。图片所示为相应细胞表达OFP的荧光图。
转染干细胞
图8. 使用Lipofectamine ? 3000转染H9干细胞 (A)或iPSC (B)。
*不必购买。此次*面向中国大陆境内年满21岁的生命科学专业人士。样品申请必须于2014年6月30日之前或者样品发放完毕之前提交给我们,以二者之中的较早者为准。样品规格为0.1 mL。每名顾客限领一份。医护专业人士不得参与此次*活动。本次*不享受其它折扣或*。如遇法律或法规,或公司/机构政策禁止、许可或限制,本次活动作废。可能会适用其他未注明的限制条件。
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