Takara反转录试剂RT reagent Kit (Perfect Real Time)
Takara反转录试剂RT reagent Kit (Perfect Real Time)
试剂盒成分:
5×PrimeScript Buffer (for Real Time)*1 | 400 μl |
PrimeScript RT Enzyme Mix I*2 | 100 μl |
Oligo dT Primer (50 μM) | 100 μl |
Random 6 mers (100 μM) | 400 μl |
RNase Free dH2O | 1 ml |
EASY Dilution (for Real Time PCR)*3 | 1 ml |
Takara反转录试剂RT reagent Kit (Perfect Real Time)
本制品是Real Time RT-PCR用的理想反转录反应试剂。使用具有较强延伸能力的PrimeScript RTase可以在较短时间内高效合成Real Time PCR用cDNA。操作简单,适合进行高通量分析。进行2 Step Real Time RT-PCR反应时,与SYBR® Premix Ex Taq™ II (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR820Q/A/B) 、SYBR Fast qPCR Mix (Code No. RR430S/A/B) , SYBR Premix Ex Taq (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR420Q/A/B) 、 或Probe qPCR Mix (Code No. RR391S/A/B) 试剂配合使用,能进行高性能的基因表达分析。 本制品提供了SYBR Green分析法和探针分析法各自适合的反应体系,可以根据分析方法选择体系。
Takara反转录试剂RT reagent Kit (Perfect Real Time)
1. 可以快速、高效合成Real Time PCR用cDNA,是进行2 Step Real Time RT-PCR反应的理想试剂。
2. 含有Oligo dT Primer和Random 6 mers两种反转录引物,可根据实际情况区别使用。反转录反应可以使用Random 6 mers或Oligo dT Primer,也可以Oligo dT Primer和Random 6 mers同时使用。只扩增一种目的基因时,也可以使用Specific Primer作为反转录引物。
3. 本制品提供了SYBR Green qPCR分析法和探针qPCR分析法各自适合的反应体系,可以根据分析方法选择体系。
注意:以下是SYBR Green qPCR分析法和探针qPCR分析法进行反转录实验的区别
① 用于反转录实验RT Primer Mix添加量。
② 用于反转录实验total RNA的添加量。
4. Real Time RT PCR定量需要建立标准曲线,建立标准曲线的条件就是需要将总RNA和反转录cDNA稀释到较低的浓度。如果用水或TE Buffer稀释时,由于模板浓度低不稳定,因而会缩小曲线范围,结果精度降低。本制品中附加了标准曲线制作用稀释液EASY Dilution (for Real Time PCR),将Total RNA或cDNA稀释至低浓度时也能够进行准确稀释,容易在宽广范围内获得准确定量的标准曲线。