DNeasy Blood Tissue Kit(250)qiagen试剂盒 分子生物试剂
DNeasy Blood Tissue Kit(250)qiagen试剂盒
从动物血液和组织、细胞、酵母、细菌或者病毒中纯化总DNA
为各种类型样本提供标准化的纯化方法
即使是特殊类型起始样本也可以获得高产量DNA
高品质DNA
经过优化的操作方法适合处理多种起始样本
可选择离心柱方式或96孔板高通量方式
DNeasy Blood & Tissue Kit采用基于硅胶膜技术的离心柱或96孔板方式快速方便的纯化DNA。大多数样本可直接用蛋白酶K消化处理，无需机械破碎，减少了手动操作时间。为特殊样本提供优化的纯化方法，获得高重复性、高纯度的DNA，用于生物研究、基因型分析和兽医病理研究。DNA纯化流程可以使用DNeasy Blood & Tissue Kit，在QIAcube全自动核酸纯化仪上自动化进行。
DNeasy Blood Tissue Kit(250)qiagen试剂盒
DNA产量。
使用DNeasy Blood & Tissue Kit从100 µl全血中纯化DNA。羊：从50 µl羊全血中纯化DNA。使用超过50 µl的羊血时，DNA产量没有明显增加。鸡：从5 µl鸡全血中纯化DNA。鸟类血液中含有核红细胞，因此其DNA产量比哺乳动物的高。
DNeasy Mini和96实验流程。
高效的16重PCR。
使用DNeasy Blood & Tissue Kit从人类K562细胞中纯化基因组DNA。使用QIAGEN Multiplex PCR Kit对图示量的DNA和16对引物进行多重PCR，反应平行进行两次。M: 100 bp ladder。
高品质DNA。
使用DNeasy Blood & Tissue Kit从图示的动物样本中纯化DNA，并进行琼脂糖凝胶电泳分析。对于每个样本，都对0.5 µg未经过酶处理的DN（左侧）、或1 µg经过EcoRI处理的DNA（右侧）进行了分析。M: lambda-HindIII。
对马进行基因分型。
从三批棕色马的鬃毛中纯化获得DNA，并使用MSH和ASIP PCR对毛色基因型进行分析。[A] MSH PCR产物用TaqI酶处理。马1和2确定为Ee杂合体，携带红色毛色的隐性等位基因e。[B]对ASIP PCR产物分析得出，马1和2为Aa杂合体，携带黑色毛色的隐性等位基因a。+：黑色马Ee aa阳性对照。–阴性对照。M：标记物。
高通量纯化。
使用DNeasy 96 Blood & Tissue Kit从24个小鼠尾和24个大鼠尾样本中纯化DNA。在1%的琼脂糖凝胶上进行DNA电泳分析。M: lambda-HindIII。
Real-time PCR。
Borrelia sp.是由蜱携带的病原体，可导致人类或其他哺乳动物患莱姆病。使用DNeasy Blood & Tissue Kit从蜱中纯化DNA。在LightCycler仪器上使用artus Borrelia LC PCR Kit，通过real-time PCR检测Borrelia DNA。阳性样本曲线的最di处对应每次PCR反应5个拷贝DNA。
对猪进行基因分型。
使用DNeasy Blood & Tissue Kit从猪耳刻样本中纯化DNA，然后使用Biotype AG公司的Animaltype Pig PCR Amplification Kit和QIAGEN HotStarTaq DNA Polymerase进行扩增。电泳图显示：12个多态性四核苷酸微卫星和一个性别鉴定标记物（SBH23）的遗传指纹图谱。
高效的DNeasy Blood & Tissue操作流程能够从动物血液和组织样本中纯化大量的总DNA。优化的实验方案可确保非标准样本的高产量，如动物毛发和培养细胞、固定的组织，或者革兰氏阳性和阴性细菌。独te的在线实验方案参考文库，可从酵母、昆虫、毛发和其他类型样本中纯化DNA。
| 样本来源 | 样本量 | DNA（µg） |
|---|---|---|
| 哺乳动物血液 | 100 µl | 3–6 |
| 鸟类血液 | 5 µl | 9–40 |
| HeLa细胞 | 2 x 106 | 15–25 |
| 肝脏 | 25 mg | 10–30 |
| 脑 | 25 mg | 15–30 |
| 肾脏 | 25 mg | 15–30 |
| 脾脏 | 10 mg | 5–30 |
| 小鼠尾 | 1.2 cm（尾部） | 10–25 |
| 大鼠尾 | 0.6 cm（尾部） | 20–40 |
| 猪耳 | 25 mg | 10–30 |
| 马毛 | 10 根毛发 | 2–4 |
| 鱼鳍 | 20 mg | 10–20 |
| 鱼卵（鲭鱼） | 10 mg | 5–10 |
DNeasy Blood & Tissue Kits简化了从多种样本类型中纯化DNA的流程，包括在生命科学、兽医学和基因分型研究应用中常见的动物种类。纯化得到的DNA不含PCR抑制剂，能在标准多重real-time PCR中进行灵敏的检测。DNeasy Blood & Tissue Kits确保了可靠的实验结果，从转基因小鼠的实验室分析到家畜的育种项目和种系基因分型研究。可以用DNeasy 96 Blood & Tissue Kit方便地扩大常规的检测应用的规模。
DNeasy Blood & Tissue Kit适用于从不同的样本中，包括新鲜或冷冻的动物组织和细胞、血液或者细菌，快速纯化总DNA（如，基因组、线粒体和病原体等）。
DNeasy膜整合了硅胶膜的结合特性，经简单显微离心技术或者QIAGEN 96-Well-Plate Centrifugation System处理即可。在高浓度离液盐的环境中，DNA吸附在DNeasy膜上，可以除去溶液中水合分子的水分。DNeasy Blood & Tissue操作流程中设计的缓冲液条件，旨在使DNA特异性吸附到硅胶膜上，并且优化去除污染物和酶抑制剂。
纯化过程不需要苯fen或氯仿抽提或乙醇沉淀，仅涉及少量手工步骤。这使得DNeasy Blood & Tissue Kits非常适合同时处理多个样本。对于高通量的应用，DNeasy 96 Blood & Tissue Kit能够同时处理96或192个样本。
可靠的硅胶膜技术，利用便捷的离心柱或96孔板形式，确保了快速可重复的DNA纯化，不再需要有机抽提和乙醇沉淀。样本首先用蛋白酶K裂解。调整缓冲条件，以提供的DNA结合条件并将裂解物上样到DNeasy Mini离心柱或DNeasy 96孔板上。在离心过程中，DNA选择性地结合到DNeasy膜上，污染物通过。余下的污染物和酶抑制剂将在两个高效的洗涤步骤中被去除。然后，用水或缓冲液将DNA洗脱，待用。
DNeasy Mini离心柱预装在收集管中，并且单独封存，确保方便和安全。使用DNeasy Mini离心柱的纯化过程可在QIAcube全自动核酸纯化仪上自动进行。DNeasy 96 Blood & Tissue Kit可使用QIAGEN 96-Well-Plate Centrifugation System以96孔板形式进行高通量处理。
DNeasy Blood & Tissue Kits提供高品质DNA，可直接用于多种下游分析，包括：
生命科学研究
家畜育种
种系基因分型研究
兽医病理分析研究
常规的应用检测
特点 | 参数 |
| Applications | PCR, real-time PCR, genotyping |
| Elution volume | 100–200 µl |
| Format | 96-well plate, spin column |
| Main sample type | Blood, tissue |
| Processing | Manual |
| Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or protein | DNA |
| Sample amount | 100 µl/25 mg |
| Technology | Silica technology |
| Time per run or per prep | 20 minutes – 1 hour |
| Yield | 6 µg/30 µg |
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