Thermo Pierce™ 蛋白 A/G 琼脂糖

该 Thermo Scientific NAb 蛋白 A/G 离心试剂盒便于对各种样品类型中的抗体进行快速、小规模亲和纯化。每个试剂盒都包括足够用于纯化至少 2 份抗体样品的 NAb 蛋白 A/G 离心柱、收集管、缓冲液和简化方案。

Pierce 蛋白 A/G 琼脂糖的特点：

•蛋白 A/G – 蛋白 A 和蛋白 G 的抗体结合结构域的固定化重组融合蛋白可对几乎任何哺乳动物物种进行多克隆 IgG 纯化
• 琼脂糖树脂 – 支持物为交联 6% 微珠状琼脂糖 (CL-6B)，这是蛋白亲和纯化方法的较常用树脂
• 惰性且稳定 – *的生产方法通过不带电荷的抗浸出性共价键固定蛋白 A/G，因此非特异性结合较低且能够多次使用而不降低得率
• 标准容量 – Pierce 蛋白 A/G 琼脂糖包含正常上样量的固定化蛋白 A/G，提供大于 7 mg 人 IgG/mL 树脂的结合容量

Pierce 蛋白 A/G 琼脂糖包含已共价固定至高质量交联 6% 微珠状琼脂糖 (CL-6B) 上的纯化蛋白 A/G 重组融合蛋白。该特殊种类的树脂可提供通用的色谱特点组合，用于从哺乳动物血清样品中获得高得率的全 IgG 和对全 IgG 进行高纯度纯化。琼脂糖微珠的物理和化学特性适用于许多亲和纯化系统。

蛋白 A/G 是一种基因工程化蛋白，结合了蛋白 A 和蛋白 G 的 IgG 结合结构域。该融合蛋白在大肠杆菌中表达。蛋白A/G含有蛋白A的四个Fc结合结构域和蛋白G的两个Fc结合结构域，最终分子量为50,460道尔顿（SDS-PAGE中测得为40至45kDa）。蛋白 A/G 的 pH 值依赖性低于单独的蛋白 A，但具备蛋白 A 和 G 的累加特性。

蛋白 A/G 可与所有的人 IgG 亚类结合，因此是用于纯化尚未确定亚类的多克隆或单克隆 IgG 抗体的理想选择。此外，它还可结合IgA、IgE、IgM和IgD（后者结合力较弱）。蛋白A/G还可与小鼠所有IgG亚类结合，但不结合小鼠IgA、IgM或血清白蛋白。因此，蛋白A/G是纯化和检测小鼠IgG各亚类单克隆抗体的佳绝选择，避免了IgA、IgM和小鼠血清白蛋白的干扰。小鼠单克隆的个别亚类与嵌合蛋白 A/G 的亲和力很可能强于与蛋白 A 或蛋白 G 的亲和力。

Pierce 蛋白 A/G 琼脂糖使用 Thermo Scientific AminoLink 偶联化学法制备，该方法与传统配体固定方法相比具有多项优势。AminoLink 固定后，琼脂糖珠的糖单体与蛋白 A 上的天然赖氨酸残基通过简单的酰胺键结合。与典型的溴化氰 (CNBr) 固定法不同，AminoLink 方法不引入任何新的化学基团，从而避免了可能导致的非特异性结合，并且形成基本不可逆的稳定结合。所得的高结合能力树脂在多轮抗体纯化之后仍然能保留功能性固定化蛋白 A/G。

Pierce 蛋白 A/G 琼脂糖可结合血清、腹水、细胞培养上清液和其他抗体样品中几乎所有同种型和哺乳动物物种的 IgG，从而实现高效抗体纯化。由于固定化蛋白 A/G 结合了蛋白 A 和蛋白 G 的免疫球蛋白结合结构域，该树脂可有效进行多种哺乳动物宿主物种中 IgG 抗体的亲和纯化。

交联 6% 微珠状琼脂糖 (CL-6B) 的特性：
•支持 pH 值稳定性：2 至 14（短期）；3 至 13（长期）
• 平均粒径：45 至 165 微米
• 排阻极限：10,000至4,000,000 道尔顿
•体积流速：约1 mL/分钟（对于1 cm 直径柱）
•线性速度：30 cm/h
• 压力：低于 25psi (1.5 bar)；定义为树脂可承受的跨色谱柱压降（注：液相色谱装置的指示表压可能测量的是总系统压力，而不是跨色谱柱压降。）

Thermo Pierce™ 蛋白 A/G 琼脂糖